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    微观侦探：ELISA酶联免疫吸附测试
    来源： 时间：2024-05-20 10:01:19 浏览：1390次


    微观侦探：ELISA酶联免疫吸附测试
     
    ELISA酶联免疫吸附测试（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种用于检测和定量蛋白质、肽、抗原、抗体等生物分子的免疫学分析方法；作为一种高灵敏度、高特异性的检测技术，ELISA在生物科研、临床诊断、疾病监测、疫苗研发等领域发挥着重要作用。

    一、原理
    ELISA技术基于抗原与抗体之间的特异性结合反应。
    在ELISA实验中，待检测的生物分子（抗原）首先与固相载体上的抗体结合，然后加入酶标记的二抗，最后通过添加底物并测量酶促反应的产物生成量，从而间接反映出待检测生物分子的含量。
    二、分类
    根据检测目标物的不同，ELISA技术可分为以下几种类型：
    1. 直接ELISA：待检测抗原与固相抗体直接结合，然后加入酶标记的二抗进行检测。
    2. 间接ELISA：先将待检测抗原与固相抗体结合，再加入酶标记的抗体进行检测。
    3. 竞争ELISA：待检测抗原与酶标记抗体竞争性地与固相抗体结合，通过测量酶标记抗体与固相抗体的结合量来反映待检测抗原的含量。
    4. 夹心ELISA：利用两种不同抗原决定簇的抗体分别固定在固相载体和酶标记载体上，待检测抗原位于两者之间，形成“夹心”结构，通过测量酶标记抗体与固相抗体的结合量来反映待检测抗原的含量。
    三、步骤
    1. 包被：将抗体或抗原固定在固相载体（如微孔板）上。
    2. 洗涤：去除未结合的游离分子。
    3. 加样：加入待检测样品，使抗原与抗体在固相载体上结合。
    4. 洗涤：去除未结合的游离分子。
    5. 加酶标记二抗：加入酶标记的二抗，与结合在固相载体上的抗原或抗体结合。
    6. 洗涤：去除未结合的游离分子。
    7. 加底物：加入底物，酶标记二抗催化底物生成产物。
    8. 终止反应：加入终止剂，终止酶促反应。
    9. 测量：通过酶标仪测量产物生成量，从而间接反映待检测生物分子的含量。
    四、应用
    1. 生物科研：ELISA技术在生物科研领域中发挥着重要作用，可用于检测蛋白质、肽、抗原、抗体等生物分子，为研究生物体内的生物过程提供有力支持。
    2. 临床诊断：ELISA技术在临床诊断中具有广泛应用，如病毒感染、细菌感染、自身免疫性疾病、肿瘤标志物等检测。
    3. 疾病监测：ELISA技术可用于疾病监测，如传染病、慢性病等，为及时发现和控制疾病提供重要手段。
    4. 疫苗研发：ELISA技术在疫苗研发中具有重要意义，可用于检测疫苗抗原、评估疫苗免疫效果等。
    5. 食品安全：ELISA技术在食品安全领域也有应用，如检测食品中的有害物质、病原体等。
    五、优缺点
    1. 优点：高灵敏度、高特异性、操作简便、易于自动化、适用于多种样品类型。
    2. 缺点：对样品制备和操作要求较高、可能出现假阳性结果、成本相对较高。
     


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    全部 3小时前 四川
    文字是人类用符号记录表达信息以传之久远的方式和工具。现代文字大多是记录语言的工具。人类往往先有口头的语言后产生书面文字，很多小语种，有语言但没有文字。文字的不同体现了国家和民族的书面表达的方式和思维不同。文字使人类进入有历史记录的文明社会。
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