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克隆形成

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项目介绍

细胞克隆形成率即细胞接种存活率,是测定单个细胞增殖能力的有效方法,指单个细胞在体外持续增殖6代以上其后所形成的细胞群,形成肉眼可见的克隆,通过计数得出克隆形成率,可对受检细胞的增殖潜力作定量分析,可以反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。常用方法有平板克隆形成和软琼脂克隆形成。常用于抗肿瘤药物敏感性测定、基因治疗、肿瘤放射生物学等方面的研究。

样品要求

1、平板克隆形成试验方法简单,适用于贴壁生长的细胞(细胞生长快慢均可)。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。

2、软琼脂培养克隆形成试验适用于悬浮生长的细胞以及繁殖较快的贴壁细胞。

3、请填写完整送样单或提供详细的实验方案。


项目案例

光学显微镜下的克隆细胞

克隆形成原始图

常见问题
1、克隆形成的目的?

1)通过对细胞处理后在细胞培养板上的克隆形成能力来提示处理后细胞的增殖能力。

2)评价不同杀伤因素(药物、基因等)对肿瘤细胞增殖能力或群体依赖性的敏感性;

3)评价细胞在体内成瘤性,癌细胞不一定都可以在体内成瘤,但若体外克隆能力越强,即表明体内成瘤性越强,算是一种模拟体内成瘤的体外实验。

2、克隆形成的分类?

克隆形成依据采用的培养介质的不同,分为平板克隆和软琼脂克隆两类。

1. 平板克隆形成(Colony formation):细胞培养在培养基中,应用于贴壁的细胞。

2. 软琼脂克隆形成(soft agar colony formation):细胞被琼脂糖挂起来,主要应用于悬浮的肿瘤细胞和转化细胞系。

3、2种细胞克隆方式,如何选择?

根据实验对象和目的选择,平板克隆检测贴壁肿瘤细胞的增殖能力和致瘤性,软琼脂克隆形成实验除了检测贴壁细胞,还能检测悬浮肿瘤细胞和转化细胞系,具有平板克隆不可取代的优势。若只是简单评价贴壁细胞的增殖能力和群体依赖性,则选择平板克隆即可。

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