细胞增殖及毒性检测的常见实验方法-测试狗·科研服务

预存

Document

当前位置：文库百科 › 文章详情

细胞增殖及毒性检测的常见实验方法

来源：时间：2024-09-30 10:05:50 浏览：2409次

细胞增殖及毒性检测的常见实验方法

细胞增殖及毒性检测是生物医学研究中的重要内容，对于药物筛选、毒理学研究等领域具有重要意义。

以下介绍几种常见的细胞增殖及毒性检测实验方法：

一、MTT实验（噻唑蓝比色法）

1. 原理：MTT实验是一种检测细胞增殖的方法；MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐）可被活细胞内的线粒体酶还原成紫色结晶物甲簪，而死细胞无此功能；通过溶解结晶物，可测定吸光度，从而反映细胞增殖情况。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，加入MTT溶液；（3）继续培养4-6小时，弃去上清，加入DMSO溶解结晶；（4）酶标仪测定570nm处的吸光度值。

二、CCK-8实验（细胞计数试剂盒-8）

1. 原理：CCK-8实验与MTT实验类似，但其使用的试剂为WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯偶氮)-5-(2,4-二硫唑基)）盐；WST-8在细胞内的脱氢酶作用下产生黄色的甲簪，吸光度值与活细胞数量成正比。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，加入CCK-8溶液；（3）继续培养1-4小时，酶标仪测定450nm处的吸光度值。

三、Brdu实验（5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸实验）

1. 原理：Brdu是一种类似胸腺嘧啶的核苷酸，可掺入DNA合成过程中；通过检测Brdu的掺入量，可以反映细胞增殖情况。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，加入Brdu溶液；（3）继续培养一定时间，固定细胞，加入抗Brdu抗体；（4）酶标仪测定450nm处的吸光度值。

四、克隆形成实验

1. 原理：克隆形成实验是通过统计克隆形成率来评价细胞增殖能力；克隆形成率越高，细胞增殖能力越强。

2. 方法：（1）将细胞接种于培养皿，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，弃去上清，固定细胞，染色；（3）显微镜下计数克隆数，计算克隆形成率。

五、EdU实验（5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷酸实验）

1. 原理：EdU是一种新型的DNA标记物，可替代Brdu进行细胞增殖检测；EdU与DNA的亲和力更高，检测信号更稳定。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，加入EdU溶液；（3）继续培养一定时间，固定细胞，加入荧光标记的抗EdU抗体；（4）荧光显微镜下观察细胞荧光强度。

六、LDH实验（乳酸脱氢酶释放实验）

1. 原理：LDH是一种胞内酶，当细胞膜受损时，LDH会释放到细胞外；通过检测培养上清中的LDH活性，可以评估细胞毒性。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，收集上清；（3）加入LDH底物，酶标仪测定490nm处的吸光度值。

七、中性红摄取实验

1. 原理：中性红是一种细胞活性染料，活细胞可将其摄入细胞内；通过测定细胞内中性红的含量，可以评估细胞毒性。

2. 方法：（1）将细胞接种于96孔板，加入不同浓度的待测物质；（2）培养一定时间后，加入中性红溶液；（3）继续培养一定时间，弃去上清，溶解细胞内的中性红；（4）酶标仪测定540nm处的吸光度值。

上一篇：氧氮氢分析仪的特点优势与应用领域分析

下一篇：预存特惠 || 预存赠高额测试费，最高享19%加赠

相关文章

一文详解扫描电子显微镜(SEM)的工作原理及应用技术

2023-10-08

热重分析（TG-DTG）曲线的几种解析方法

2023-12-26

接触角测试（CA）的原理、样品制备要求及实际应用

2023-11-16

一文详细介绍he染色的基本原理、实验步骤及注意事项

2023-11-23

恒电流间歇滴定法GITT的基本原理以及测试教程

2022-08-12

TMA技术的基本概念、应用领域以及实际操作中的要点

2023-12-06

项目推荐/Project

克隆形成

细胞毒性/增殖

热门文章/popular

基础理论丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、谱线结构）

晶体结构可视化软件 VESTA使用教程（下篇）

手把手教你用ChemDraw 画化学结构式：基础篇

【科研干货】电化学表征：循环伏安法详解（上）

电化学实验基础之电化学工作站篇（二）三电极和两电极体系的搭建和测试

【科研干货】电化学表征：循环伏安法详解（下）

微信扫码分享文章

举报有奖

TEL: 191-3608-6524

如：在网络上恶意使用“测试狗”等相关关键词误导用户点击、恶意盗用测试狗商标、冒称官方工作人员等情形，请您向我们举报，经查实后，我们将给予您奖励。

举报内容：

200

上传附件：

文件格式不正确，请重新上传文件格式不正确，请重新上传文件格式不正确，请重新上传

文件格式：jpg、jpeg、png、gif、tif、doc、docx、ppt、pptx、xls、xlsx、pdf、zip、rar

联系方式

姓名

电话

提交意见

意见反馈

Suggestions

您可以在此留下您宝贵的意见，您的意见或问题反馈将会成为我们不断改进的动力。

意见类型

测试服务

网站功能

财务报账

其他类型

意见内容

200

联系方式

姓名

电话

提交意见