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生物样本透射电镜(TEM)

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功能介绍

1. 主要用于生物样品(细胞,生物组织)材料内部形貌的分析和研究;

2. 对样品进行包埋,超薄切片,染色等工序,制成TEM样品;

3. 通过透射电镜观察样品内部的组织形貌。

制样要求

1. 样品需要用戊二醛固定,固定24小时再送样4℃保存,戊二醛的量要多,样品管保留一定量的空气。

2. EP管用封口膜封好(防止管口漏液),EP管外用泡沫包好,避免低温冰冻造成样品结冰。

3. 样品中固体含量至少一颗芝麻粒大小,细胞和菌类要米粒大小;生物新鲜组织样品取材到相应浓度的戊二醛固定液里,不益超过1min,以便较少自融,戊二醛需要预冷4-10℃再使用;

4. 一般送样方式为4℃冷藏,冷冻送样需要在订单中特别指明。

5. 该项目不支持回收,请自行留样。

6. 可测试细菌、细胞、生物组织等样品。

请尽量注明图片标尺或具体需要拍摄的内容,可输出10um、5um、2um、1um、500nm、200nm和100nm的标尺;如未注明,实验室不接受因标尺问题导致的免费补拍或重拍。

测试案例

TEM观察纳米颗粒在细胞内具体的结合位点

锈菌的TEM图

动物组织的TEM图

某细菌的TEM图

常见问题

Q1、动物样品如何处理送样?

动物组织样本:

1. 请尽快固定。动物组织最好在离体后1 min内开始固定。

2. 非灌注的组织,厚度不超过4 mm,请用恰当方式(比如切宽薄片)体现位置和层次关系。请尽量不要事先切成很小的颗粒

3. 请用锋利薄刀片切组织,朝一个方向划,不要来回切割,不要挤压、拉扯。

4. 含有食物残渣、大量血液或其它黏附物的组织,请用生理盐水漂洗,再投入固定液。

5. 请保证固定液量充足。固定液和组织的体积比不小于20 : 1。

6. 最初的30 min以后,最好在4 ℃的固定液中浸泡,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使组织结冰。冬季宁可常温送样)。

Q2、细胞如何处理送样?

细胞样本处理程序:

1. 刮取细胞,收集在离心管中,1000 rpm离心5 ~ 10 min(初次离心参数可按自己的经验调整,目的是不损伤细胞结构的情况下去掉培养液成分)。

2. 弃上清,加入常温(平时固定液4℃保存,临用前拿出复温到室温或体温)的固定液,重悬细胞。常温固定2 min。

3. 转移至1.5 ml尖底EP管,2000 rpm离心10 min。此步离心后,细胞应为约半颗绿豆大小。

4. 用吸管小心弃上清,加入室温的0.1 mol/L PB或等渗PBS,重悬细胞。再以1000 rpm离心5 ~10 min。

5. 以相同条件重复上述重悬、离心步骤,再次漂洗细胞。

6. 用吸管小心弃上清,加入预热到40℃的GT2专用溶液重悬细胞;立即以3000 rpm离心10 min。

7. 用吸管尽快小心弃上清;然后密闭管盖,转入4℃静置10 min(严禁结冰)。

8. 沿管壁缓慢加入固定液,不要冲击细胞团,静置30 min后可送样。

请在4℃保存或运输,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使样品结冰。冬季宁可常温送样)。

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