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HE染色

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HE染色

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项目介绍

苏木精 - 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。 苏木精 染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为 酸性染料 ,主要使细胞质和 细胞外基质 中的成分着红色 。HE染色法是组织学、 胚胎学 、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

样品要求

1、样品可为新鲜组织、细胞爬片、4%多聚甲醛固定的组织/细胞、蜡块或OCT包埋包埋剂包好的细胞/组织,以及已经做好切片的组织。

2、样品类型不一样,价格有所差异。(需要进行前处理,如需包埋、切片,则需收取前处理费用)

项目案例

HE染色(兔心肌)

HE染色(肾小球)

HE染色(心梗)

常见问题
1、切片在脱蜡后出现大量白色斑点

(1)烤(烘)片温度太低,玻片在脱蜡前没有充分烤(烘)干—先用无水乙醇去除玻片上的水分,然后重新用二甲苯进行脱蜡处理。

(2)切片在二甲苯停留时间不足 或停留时间过久—切片需退回到二甲苯操作步骤,使其停留时间相对长些,或更换二甲苯,进行重新染色。

2、细胞核染色暗淡,即苏木精染色太淡

(1)切片在苏木精染色液停留时间太短

(2)苏木精染色液过度氧化,失去染色能力,不能再继续使用

(3)分化步骤时间过长。如果是骨组织细胞核暗淡,则多数是由于脱钙过度造成。

改善方法:切片需重新染色,如果组织在固定液固定时间过长,细胞核染色能力将减弱,需增加其在苏木精染色液的时间,或用一些方法增加组织的嗜碱性,以改善细胞核的着色。

3、细胞核过染,即苏木精颜色过深,甚至苏木精颜色的分布占据了细胞质的位置

(1) 切片在苏木精染色液停留时间过长

(2) 切片太厚

(3) 分化步骤时间过短

改善方式:如果切片不是因为太厚,对切片进行重新染色,对于染色和分化时间做出适当地调整;如果确定是由于切片太厚导致细胞核过染,则需要重新切片。

4、细胞核呈红、棕色改变

苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足—每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力,发现氧化过度及时更换。其次,可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氢钠等,在苏木精染色后,给切片足够的蓝化时间。

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