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流式细胞分析分选操作和使用中的注意事项
来源: 时间:2024-11-11 10:01:56 浏览:2559次

流式细胞分析分选操作和使用中的注意事项
 
流式细胞分析分选(Flow Cytometry SortingFACS)是一种利用流式细胞仪对细胞群体进行快速、准确分选的技术;它广泛应用于生物学、医学、药学和细胞生物学等领域。

在进行流式细胞分析分选操作和使用过程中,需要注意以下事项:
一、实验前准备
1. 样品制备:确保样品的质量和活性,避免死细胞、细胞碎片和其他杂质对分选结果的影响;制备过程中,细胞浓度、染色和固定等步骤需严格按照操作规程进行。
2. 仪器检查:在开始分选前,检查流式细胞仪各部件是否正常,包括喷嘴、液流系统、激光光源、检测器等;确保仪器清洁,避免交叉污染。
3. 耗材准备:准备足够的分选耗材,如样品管、收集管、废液管等;检查耗材是否完好,避免漏液或损坏。
二、仪器设置与优化
1. 参数设置:根据实验需求,设置合适的分选参数,如分选速度、喷嘴大小、液流速度等;确保参数设置能满足细胞分选的要求。
2. 光路优化:调整激光光源和检测器,使信号达到最佳状态;检查光学系统是否清洁,避免信号衰减。
3. 色标设置:根据细胞染色的特点,设置合适的色标;确保色标范围能够覆盖目标细胞群体。
三、分选操作注意事项
1. 避免气泡:在加样和运行过程中,尽量避免产生气泡;气泡会影响细胞分选的准确性和速度。
2. 细胞浓度:调整细胞浓度,使分选过程中细胞单行通过喷嘴;过高或过低的细胞浓度都会影响分选效果。
3. 防止交叉污染:在分选不同样品时,及时更换或清洁喷嘴、样品管等耗材,避免交叉污染。
4. 观察分选过程:在分选过程中,实时观察细胞信号,确保分选的准确性和稳定性;如有异常,及时调整参数。
5. 质量控制:在分选过程中,定期收集样本进行质量控制,验证分选的准确性和纯度。
四、分选后处理
1. 细胞收集:分选完成后,及时将收集的细胞转移到适当的培养体系中,进行后续实验。
2. 细胞活性检测:评估分选后细胞的活性,确保细胞在分选过程中不受损伤。
3. 数据记录:详细记录分选过程中的各项参数,以便后续分析和优化。
五、注意事项
1. 个人安全:操作过程中,注意个人防护,避免接触有害物质;佩戴防护眼镜、手套等。
2. 仪器维护:定期对仪器进行维护和保养,确保设备性能稳定。
3. 环境保护:妥善处理废液和耗材,遵守环保规定。
六、常见问题与解决方案
1. 分选效率低:检查细胞浓度、喷嘴大小、液流速度等参数,调整至合适范围;优化色标设置,提高分选准确性。
2. 交叉污染:更换或清洁喷嘴、样品管等耗材,避免交叉污染。
3. 细胞活性下降:优化分选参数,减少细胞在分选过程中的损伤;加强细胞收集后的培养条件控制。
4. 信号漂移:定期进行仪器校准,确保信号稳定。

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全部 3小时前 四川
文字是人类用符号记录表达信息以传之久远的方式和工具。现代文字大多是记录语言的工具。人类往往先有口头的语言后产生书面文字,很多小语种,有语言但没有文字。文字的不同体现了国家和民族的书面表达的方式和思维不同。文字使人类进入有历史记录的文明社会。
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