材料样本-低电压透射电镜（TEM）-测试狗科研服务

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材料样本-低电压透射电镜（TEM）

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材料样本-低电压透射电镜（TEM）

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项目介绍

低电压透射电子显微镜（低电压TEM）采用远低于传统透射电镜（通常为80kV～120 kV）的加速电压，使电子束在穿透薄样品时，因低能电子与物质相互作用更强、散射截面更大，从而显著提升轻元素材料和弱散射样品的成像衬度，同时有效降低电子束对敏感样品的辐射损伤，实现高分辨结构观察与分析。

1. 主要用于样品（细胞，生物组织）材料内部形貌的分析和研究；

2. 对样品进行包埋，超薄切片，染色等工序，制成TEM样品；

3. 通过透射电镜观察样品内部的组织形貌。

样品要求

1. 样品需要用戊二醛固定，一般固定2小时即可冰袋运输（特殊样品需要固定时间长一些），戊二醛的量要多，样品管保留一定量的空气。

2. EP管用封口膜封好（防止管口漏液），EP管外用泡沫包好，避免低温冰冻造成样品结冰。

3. 样品中固体含量至少一颗芝麻粒大小，细胞和菌类要米粒大小；生物新鲜组织样品取材到相应浓度的戊二醛固定液里，不益超过1min，以便较少自融，戊二醛需要预冷4-10℃再使用；

4. 一般送样方式为4℃冰袋冷藏运输，冷冻送样需要在订单中特别指明。

5. 该项目不支持回收，请自行留样。

6. 可测试细菌、细胞、生物组织等样品。

7.请尽量注明图片标尺或具体需要拍摄的内容，可输出10um、5um、2um、1um、500nm、200nm和100nm的标尺；如未注明,实验室不接受因标尺问题导致的免费补拍或重拍。

项目案例

TEM观察纳米颗粒在细胞内具体的结合位点

锈菌的TEM图

动物组织的TEM图

某细菌的TEM图

常见问题

1、为什么通过光镜（免疫荧光等）和分子实验（ELISA/WB等）观察到自噬、凋亡等现象，摸索出信号最强的时间点取材，结果电镜下细胞不是结构烂就是没有期待的结构呢？可能的原因有哪些？

答：光镜和分子水平的变化与超微结构变化不完全平行！是基本上从来都不准确同步的，所以已经做了其他实验后想来看自噬和凋亡的，不一定能看到，铁死亡、外泌体等都有这个问题。

可能的原因有：

1.光镜分辨率不够，看上去阳性的东西，可能根本不在预期结构上。比如，线粒体相关的某标记物，光镜下看到胞质里阳性颗粒很多了，结果电镜下完全没有。精细实验后发现标记的其实是某些溶酶体。

2.生理或病理过程本身的原因。比如有老师来看凋亡，给了荧光照片，胞核标记物超级清楚，结果电镜下细胞很烂。也有给了WB结果，选的阳性最强的时段取材，结果电镜下细胞完好。他们都是同一板细胞分取的。可能分子结果反映的是表达没有，表达了不见得正在发挥作用，形态还是好的。荧光都看到了，那细胞崩裂已经开始，镜下就好不了。

2、动物普通组织取材、送样

取材原则：切薄并尽快投入固定液；注意下述要求。

1. 请尽快固定。动物组织最好在离体后1 min内开始固定。

2. 非灌注的组织，厚度不超过4 mm，请用恰当方式（比如切宽薄片）体现位置和层次关系。尽量不要事先切成很小的颗粒。

3. 请用锋利薄刀片切组织，朝一个方向划，不要来回切割，不要挤压、拉扯。

4. 含有食物残渣（如消化道）、大量血液（如心肌）或其它黏附物（如乳腺等）的组织，请用生理盐水快速漂洗，再投入固定液。

5. 请保证固定液量充足。固定液和组织的体积比不小于20 : 1。

6. 最初的30 min以后，最好在4 ℃的固定液中浸泡，严禁结冰（太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使组织结冰。冬季宁可常温送样）。

备注：

（1）组织尺寸和容器关系（只装一个的参考标准）：

芝麻到绿豆大小（如小鼠肾上腺）：请用1.5 ml EP管；

黄豆大小（小鼠肾脏）：请用5 ml离心管；