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如何在流式细胞仪上机前准备好你的样品？

来源：测试GO 时间：2022-11-11 14:50:57 浏览：1112次

样品的制备是进行流式细胞分析术的关键。流式细胞仪上机前样品的制备有以下几点：

流式细胞仪

1、细胞需悬浮于培养基或PBS中（含1%的血清或0.5%的BSA）；上机前需用200目筛网过滤细胞，为了避免细胞粘连，可以添加1mmol/LEDTA。

2、如果分选后的细胞用于继续培养，需确保样本无菌，可适量添加抗生素。

3、推荐样品体积为200-500μL。用于分析的样品推荐浓度为0.5-5×106cells/mL，用于分选的样本推荐浓度为106-107cells/mL。为提高分选的速率，可以先准备尽量浓的样本（大于107cells/mL），上机后根据分选效率再用培养基或缓冲液稀释成合适的浓度。

二、分选需准备的材料：

1、接收细胞的液体：完全培养基、血清、适合细胞存活的自制缓冲液、裂解液。

2、接收的容器：1.5mL Eppendorf管（至少加入100μL液体）、5ml BD Falcon 352054流式管（至少加入1mL液体）、15mL离心管（至少加入2 mL液体）、96孔培养板（加入100μL培养基）、PCR管（板）（加入4-10μL预扩增液）。

3、每次上机需要准备空白对照（未染色的样本）、同型对照和每一种荧光通道的单染样品来调节电压和补偿（在其他仪器上获取的电压值和补偿值不通用）；为了圈门精确及验证实验，用户可以准备FMO对照和阳性对照。

4、用户可以在分析（选）前把其他仪器上的流式图发给工作人员，为分析（选）做更充分的准备。

5、使用96孔PCR板接收单细胞的用户需要携带未使用的96孔PCR板及透明的封板膜。

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