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如何在流式细胞仪上机前准备好你的样品?
来源:测试GO 时间:2022-11-11 14:50:57 浏览:1406次

样品的制备是进行流式细胞分析术的关键。流式细胞仪上机前样品的制备有以下几点:

 

流式细胞仪 

 

1、 细胞需悬浮于培养基或PBS中(含1%的血清或0.5%BSA);上机前需用200目筛网过滤细胞,为了避免细胞粘连,可以添加1mmol/LEDTA

2、 如果分选后的细胞用于继续培养,需确保样本无菌,可适量添加抗生素。

3、 推荐样品体积为200-500μL。用于分析的样品推荐浓度为0.5-5×106cells/mL,用于分选的样本推荐浓度为106-107cells/mL。为提高分选的速率,可以先准备尽量浓的样本(大于107cells/mL),上机后根据分选效率再用培养基或缓冲液稀释成合适的浓度。

 

二、 分选需准备的材料:

 

1、 接收细胞的液体:完全培养基、血清、适合细胞存活的自制缓冲液、裂解液。

2、 接收的容器:1.5mL Eppendorf管(至少加入100μL液体)、5ml BD Falcon 352054流式管(至少加入1mL液体)、15mL离心管(至少加入2 mL液体)、96孔培养板(加入100μL培养基)、PCR管(板)(加入4-10μL预扩增液)。

3、 每次上机需要准备空白对照(未染色的样本)、同型对照和每一种荧光通道的单染样品来调节电压和补偿(在其他仪器上获取的电压值和补偿值不通用);为了圈门精确及验证实验,用户可以准备FMO对照和阳性对照。

4、 用户可以在分析(选)前把其他仪器上的流式图发给工作人员,为分析(选)做更充分的准备。

5、 使用96PCR板接收单细胞的用户需要携带未使用的96PCR板及透明的封板膜。


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全部 3小时前 四川
文字是人类用符号记录表达信息以传之久远的方式和工具。现代文字大多是记录语言的工具。人类往往先有口头的语言后产生书面文字,很多小语种,有语言但没有文字。文字的不同体现了国家和民族的书面表达的方式和思维不同。文字使人类进入有历史记录的文明社会。
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