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荧光定量PCR的优点和检测方法盘点
来源:测试GO 时间:2022-11-03 11:37:47 浏览:1562次

 荧光定量PCR检测以下优点

1.高灵敏性:可检测单个细胞基因;

2.高特异性和精确性:将DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精准性融合,应用荧光探针和光电传导,直接探测基因扩增过程中荧光信号的变化,以获得定量结果,相当于在PCR反应过程中自动完成了Northern杂交;

3.操作简便、速度快:通过计算机和分析软件实现PCR扩增、产物检测和定量分析一体化;

4.安全、无污染:FQ-PCR在全封闭状态下进行PCR扩增和产物分析,杜绝了传统PCR开放检测对环境的污染和由此导致的假阳性;

5.结果观测重复性好:一起在线实时观测,结果判断直观,避免人为因素干扰。

 内参基因ACTIN(溶解曲线)

荧光定量PCR检测的两种方法

1.SYBR GreenⅠ法

PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

2.TaqMan探针法:

探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。


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全部 3小时前 四川
文字是人类用符号记录表达信息以传之久远的方式和工具。现代文字大多是记录语言的工具。人类往往先有口头的语言后产生书面文字,很多小语种,有语言但没有文字。文字的不同体现了国家和民族的书面表达的方式和思维不同。文字使人类进入有历史记录的文明社会。
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