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    项目介绍

    单细胞凝胶电泳是检测DNA损伤快速、简便、敏感、经济的方法,因其细胞电泳形状颇似彗星,又称彗星试验(cometassay)。

    技术原理:基于有核细胞的DNA分子量很大,在DNA超螺旋结构附着在核基质中,用琼脂糖凝胶电泳将细胞包埋在载玻片上,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜及其他生物膜破坏,使细胞内的RNA、蛋白质及其他成分进入凝胶,继而扩散到裂解液中,唯独核DNA仍保持缠绕的环区附着在剩余的核骨架上,并留在原位。如果细胞未受损伤,电泳中核DNA因其分子量大而停留在核基质中,经荧光染色后呈现圆形的荧光团,无拖尾现象。若细胞受损,在碱性电泳液(PH>13中),先是DNA双链解螺旋且碱变性为单链,单链断裂的碎片分子量小即可进入凝胶中,在电泳时断链或碎片离开DNA向阳极迁移,形成拖尾。细胞核DNA损伤损伤愈重,产生的断链或碱易变性片段就愈多,其断链或短片也就愈小,在电场作用下迁移的DNA量多,迁移的距离长,表现为尾长增加和尾部荧光强度增强。因此,通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可定量测定单个细胞DNA损伤程度。目前用于彗星试验的细胞主要有两大类:原位生物细胞和哺乳动物细胞。

    项目案例

    样品要求

    1、细胞样本:每个检测样本需提供5*10^5细胞量。

    2、新鲜组织样本:需要24h内,4℃运输到达实验室。

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