彗星试验_DNA链损伤检测-测试狗科研服务

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项目介绍

单细胞凝胶电泳是检测DNA损伤快速、简便、敏感、经济的方法，因其细胞电泳形状颇似彗星，又称彗星试验（cometassay）。

技术原理：基于有核细胞的DNA分子量很大，在DNA超螺旋结构附着在核基质中，用琼脂糖凝胶电泳将细胞包埋在载玻片上，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜及其他生物膜破坏，使细胞内的RNA、蛋白质及其他成分进入凝胶，继而扩散到裂解液中，唯独核DNA仍保持缠绕的环区附着在剩余的核骨架上，并留在原位。如果细胞未受损伤，电泳中核DNA因其分子量大而停留在核基质中，经荧光染色后呈现圆形的荧光团，无拖尾现象。若细胞受损，在碱性电泳液（PH>13中），先是DNA双链解螺旋且碱变性为单链，单链断裂的碎片分子量小即可进入凝胶中，在电泳时断链或碎片离开DNA向阳极迁移，形成拖尾。细胞核DNA损伤损伤愈重，产生的断链或碱易变性片段就愈多，其断链或短片也就愈小，在电场作用下迁移的DNA量多，迁移的距离长，表现为尾长增加和尾部荧光强度增强。因此，通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可定量测定单个细胞DNA损伤程度。目前用于彗星试验的细胞主要有两大类：原位生物细胞和哺乳动物细胞。

样品要求

1、细胞样本：每个检测样本需提供5*10^5细胞量。

2、新鲜组织样本：需要24h内，4℃运输到达实验室。

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