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为什么蛋白质印迹条带大小与预期的不同？

来源：测试GO 时间：2022-09-08 15:04:17 浏览：656次

蛋白质免疫印迹法，即Western Blot法,是在分子生物学、生物化学和免疫遗传学等领域使用的一个重要实验技术。其基本原理是利用特异性抗体对经凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样本进行染色，并通过分析所染色的细胞部位和染色深度，获取有关特异蛋白质在所分析的细胞或组织中表达状况变化的信号，目前已应用于基因在蛋白质水平上的表达研究、抗体活性测定,以及疾病早期治疗等许多方面。

实验过程中的仪器展示图

蛋白质印迹法是一项根据蛋白质结构而分离蛋白质的方法。一般蛋白质越小，在胶上的移动速率就越高。但由于移动速率也会受到其它因子的影响，所以，观测得到的实际条带大小会和人们预期的结果有所不同。

常见的因素包括：

1.翻译后修饰：例如磷酸化、糖基化等，可增加蛋白质大小。

2.翻译后切割：例如大多蛋白先被合成为前蛋白，然后被切割产生活性形式，例如前半胱天冬酶。

3.剪接变体和异形体：可变剪接和异形体可能从同一基因产生不同大小的蛋白质。

4.相对电荷-氨基酸（带电和不带电）多聚体组分，例如蛋白质的二聚化。这种情况通常在还原条件下需要防止，但强相互作用会导致较大的条带出现。

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