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    TEM测试如何低速离心取材以及送样方法?
    来源:测试GO 时间:2022-09-16 14:51:47 浏览:1083次

    在我们进行TEM测试时,低速离心取材以及送样是实验的重要的一部分,下面教大家一个所有类型均适用的细胞样品操作方法:

    动物组织的TEM图

    1. 最好刮取细胞,收集在离心管中,1500 rpm离心5 ~ 10 min(初次离心参数可按自己的经验调整,目的是不损伤细胞结构的情况下去掉培养液成分)。

    2. 弃上清,加入常温(平时固定液4℃保存,临用前拿出复温到室温或体温)的3%戊二醛固定液,重悬细胞。常温固定2 min

    3. 转移至1.5 ml尖底EP管,2000 rpm离心10 min。此步离心后,细胞应为约半颗绿豆大小。

    4. 用吸管小心弃上清,加入室温的0.1M PB或等渗PBS,重悬细胞。再以1000 rpm离心5 ~10 min

    5. 以相同条件重复上述重悬、离心步骤,再次漂洗细胞(不要偷懒,要洗第二遍)。

    6. 用吸管小心弃上清,加入预热到40℃GT2(实验室提供的特殊固定液)专用溶液重悬细胞(轻轻摇匀或吹吸均可,不要有肉眼可见的大块);立即以3000 rpm离心10 min

    7. 用吸管尽快小心弃上清;然后密闭管盖,转入4℃静置10 min(严禁结冰)。

    8. 沿管壁缓慢加入固定液,不要冲击细胞团,静置30 min后可送样。

    重点:

    1)固定和各项操作都是室温条件,GT2(实验室提供的特殊固定液)本身要预热到40℃GT2凝结前没有需要预冷的步骤。

    2)取材完成后,在4℃保存,保存和运输期间严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使样品结冰。冬季宁可常温送样)。

    3)观察细胞连接的实验,严禁用消化的方法收集细胞。


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    12条评论
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    全部 3小时前 四川
    文字是人类用符号记录表达信息以传之久远的方式和工具。现代文字大多是记录语言的工具。人类往往先有口头的语言后产生书面文字,很多小语种,有语言但没有文字。文字的不同体现了国家和民族的书面表达的方式和思维不同。文字使人类进入有历史记录的文明社会。
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