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免疫染色技术的主要分类和原理

来源：时间：2022-12-27 10:36:28 浏览：4031次

广义的免疫染色包括免疫组织化学(Immunocytochemistry, IHC) 、免疫细胞化学(Immunocytochemistry, ICC) 、免疫荧光 (Immunofluorescence, IF)，流式细胞仪分析(Flow cytometry)，免疫印迹(immunoblot, IB)即Western印迹(Western blot, WB)，酶联免疫反应(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和免疫电镜(Immuno-electron microscopy, IEM)等。免疫染色(immunostaining)，包括任何基于抗原与抗体特异性结合的免疫学基本原理，检测蛋白等目的分子的技术方法。狭义的免疫染色其检测样品仅限于保持原有形态的细胞或组织，通常包括免疫组化、免疫细胞化学、免疫荧光、流式细胞仪分析和免疫电镜，而不包括免疫印迹和酶联免疫反应。

染色原理：
用酶标记的特异性抗体/抗原直接与样本中相应的抗原/抗体反应结合，再与酶的底物作用产生有色产物，沉积在抗原-抗体反应部位，即可对抗原或抗体进行定性、定位及定量研究。

免疫组织化学(Immunocytochemistry, IHC) ，即免疫组化，是应用抗原与抗体特异性结合的免疫学基本原理，最终通过化学反应显色来检测组织细胞内抗原，对其进行定位、定性及相对定量的研究方法。狭义的免疫组化，其检测的样品仅限于组织切片或者培养的组织，而广义的免疫组化其检测的样品也可以是培养的细胞。

免疫细胞化学(Immunocytochemistry, ICC)，狭义的免疫细胞化学，检测对象是培养的细胞；而广义的免疫细胞化学，其检测对象可以是培养的细胞，也可以是组织切片或者培养的细胞和组织。

免疫荧光(Immunofluorescence，IF)是一项建立在免疫学和荧光检测技术基础上的实验技术，依据抗原、抗体的反应原理进行组织或细胞内抗原物质的定位和半定量，是近代免疫学的一种重要研究手段。流式细胞仪分析(Flow cytometry)技术，也是一种免疫荧光检测技术。

免疫组化和免疫荧光所含步骤大致相同，主要包括：样本制备、抗原修复、背景封闭、抗体孵育、蛋白检测等

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