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项目介绍

细胞培养是将组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶)，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖(注意整个过程无菌)。常见细胞培养为贴壁培养和悬浮培养。

服务流程

交付内容

后续实验所需细胞数量、细胞照片以及实验报告

样品要求

冻存细胞株请使用干冰邮寄，详细的细胞培养信息以及送样要求，请与技术顾问沟通确认。

常见问题

Q1、细胞冻存液DMSO作用

DMSO属于一种可渗透到细胞内的冷冻保护剂。在细胞冷冻悬液完全凝固之前，DMSO渗透到细胞内，在细胞内外产生一定的摩尔浓度，降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度，从而保护细胞免受高浓度电解质的损伤，同时，细胞内水分也不会过分外渗，避免了细胞过分脱水皱缩。DMSO在常温下对细胞的毒性作用较大，而在4°C时，其毒性作用大大减弱，且能以较快的速度渗透到细胞内。所以，冻存时需要彻底预冷冻存液，放置在4°C需要至少30分钟的时间。最简便的方法是将冻存液一直放在4°C冰箱中，随用随取，用完放回冰箱。

Q2、为什么细胞长得慢

可能是细胞接种得太少，细胞密度太低。可以先培养，然后消化重新铺瓶，提高密度培养。

Q3、如何判定细胞是否发生支原体污染？

可以选用直接培养法、荧光染色或PCR方法检测，比较常用的是PCR。当细胞发生支原体污染时，原则上是能够去除支原体的，但是整个过程耗时耗力，还要考验个人操作能力。所以如果不是处于细胞存量很少的情况下，建议发现污染时立刻弃掉，重新培养。

Q4、为什么会出现空泡

可能是铺板时铺得不够均匀，局部过于密集，密集地方的细胞就开始状态变差、空泡增多。也可能是血清差，需要更换优质血清，及时换液。

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关于细胞克隆形成实验的方法讨论与结果分析

2023-10-25

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